Sagot:
Kadalasan ito ay isang pagsubok sa pagtitiyak ng antibody.
Paliwanag:
Sa isang ELISA napakahirap sabihin kung ang iyong antibody ay nagbubuklod sa iyong protina ng interes, isang ganap na naiibang protina, o isang hanay ng mga protina.
Ang Western blot ay gagamitin upang suriin ang pagtitiyak ng antibody (dapat mong tandaan na ang Western blot ay hindi maaaring makita ang lahat ng mga cross-reactions na may mga hindi tamang mga protina).
Sa Western blot, maaari mong makita ang laki ng protina na kung saan ang antibody ay may-bisa (hindi ka maaaring sa isang ELISA). Kung gayon, halimbawa, kung ang iyong antibody ay dapat na umiiral sa isang protina ng 56 kDa at nakikita mo ang isang banda sa ~ 56 kDa sa blot pagkatapos ay maaari kang makatwirang tiwala na ang antibody ay may bisa sa tamang protina.
Kung, sa kabilang banda, nakita mo ang isang banda na 32 kDa maaari mong tapusin na ang antibody ay may bisa sa maling protina. Gayundin, kung maraming mga banda ang nagpakita sa Western blot pagkatapos ay iminumungkahi (sa kawalan ng protina pagkasira) na ang antibody ay may-bisa sa isang hanay ng mga iba't ibang mga protina.
Sa halimbawa ng band na 32 kDa na lumilitaw sa gel, at din ang maraming mga banda, ito ay magmumungkahi na ang antibody ay walang katiyakan para sa ELISA at ang anumang mga resulta na nakikita sa ELISA ay maaaring hindi tiyak sa protina ng interes.
Kung ako ay nagpatakbo ng ganitong uri ng pagsubok maaari kong isama ang isang uri ng "nakakasagabal" reagent upang subukan ang antibody. Halimbawa, kung itinaas ko ang aking antibody sa isang peptide maaari kong isama ang peptide sa pangunahing solusyon sa antibody upang subukan ang tamang umiiral na. Iyon ay, sa presensya ng peptide hindi ko dapat makita ang banda o walang resulta mula sa ELISA sapagkat ang aking pangunahing antibody ay hindi magagawang magbigkis dahil sa pagkakaroon ng labis sa peptide.
Ano ang mga hakbang na ginamit upang pangalanan ang isang ester? + Halimbawa
Ang alkohol ay bumubuo sa unang bahagi ng pangalan, at ang acid ay bumubuo sa pangalawang bahagi. Halimbawa, CH COOH + CH CH OH CH COOOTEOCH Ang pangalan ay binubuo ng dalawang salita. Ang unang salita ay ang pangalan ng alkyl group sa alkohol. Kung ang alkohol ay CH CH OH, ang unang salita ay "ethyl". Ang pangalawang salita ay ang pangalan ng acid minus "-ic acid" plus "-ate". Kung ang acid ay CH COOH (ethanoic acid), ang pangalawang salita sa pangalan ay "ethanoate". Ang kumpletong pangalan ng ester ay "ethyl ethanoate".
Bakit hindi mo dapat hatiin ang infinitive ng isang pandiwa, halimbawa: "Upang matapang pumunta" ay dapat na "upang pumunta nang matapang." Bakit?
Kadalasan ay sundin ang 'to' sa nakumpleto na salita na walang pasubali. Ito ay karaniwan para sa adverbs upang sundin ang mga pandiwa. Sa ganitong paraan walang espesyal na diin na ibinigay. Sa gramatika, hindi ito problema sa alinmang kaso. Minsan ang mga pangungusap ay naging napakaliit kapag nahiwalay ang mga infinitibo hal. Ito ay kamangmangan sa, sa aking mapagpakumbaba na opinyon at sa opinyon ng maraming mas matalinong tao kaysa sa aking sarili, sabihin sa isang babae na mahal mo siya maliban kung tunay na ibig sabihin nito.
Bakit ginagamit ang GAPDH sa Western Blot? + Halimbawa
Ang GAPDH ay kadalasang ginagamit bilang kontrol sa pag-load. Sa Western blotting madalas naming gamitin ang GAPDH bilang isang kontrol sa paglo-load. Ang ibig sabihin nito ay na sa pamamagitan ng probing para sa GAPDH maaari naming suriin na mayroon kaming isang load na katumbas na halaga ng mga protina sa iba't ibang mga daan ng blot. Isang halimbawa ng paggamit - sinasabi namin na may sakit na sa tingin namin ay nagiging sanhi ng isang elevation ng isang partikular na protina sa cell. Magkakaroon kami ng sample mula sa "malusog" na mga selula at isa pang sample mula sa "mga sira" na mga selula. P