Bakit mahalaga na ang parehong paghihigpit na enzyme ay ginagamit upang i-cut (i-cut) ang DNA ng parehong mga organismo na ginagamit upang lumikha ng transgenic na organismo?

Bakit mahalaga na ang parehong paghihigpit na enzyme ay ginagamit upang i-cut (i-cut) ang DNA ng parehong mga organismo na ginagamit upang lumikha ng transgenic na organismo?
Anonim

Sagot:

Tingnan sa ibaba …

Paliwanag:

Ang pagbabawas ng mga enzymes ay pinutol sa mga tukoy na mga pagkakasunud-sunod upang ang parehong paghihigpit na enzyme ay dapat gamitin sapagkat ito ay makakapagdulot ng mga fragment na may parehong mga komplimentaryong malagkit na dulo, na ginagawang posible para sa mga bono na bumuo sa pagitan nila.

Mayroong ilang mga katugmang site ng paghihigpit na maaaring magamit nang sama-sama. Ang mga Xho1 at Sal1 ay mga halimbawa. Ang kanilang malagkit na mga dulo ay tumutugma, at sa gayon ay maaari silang ligot magkasama. Ngunit ang ligation ay pumapatay sa parehong Xho1 at Sal1 site, kaya hindi mo maaaring gamitin ang alinman sa mga ito upang i-cut muli (sa mga lokasyon ng ligation).

Maaari mo ring gamitin ang exonuclease o PCR upang gawing pinaka-malagkit na dulo (5 o 3 overhangs) sa mapurol na mga site - sa ganitong paraan maaari kang mag-ligate sa isang mapurol na cut site - ngunit ito ay karaniwang pumatay sa mapurol na site, pati na rin.