Paano inilalayo ng mga siyentipiko ang DNA upang pag-aralan ito?

Paano inilalayo ng mga siyentipiko ang DNA upang pag-aralan ito?
Anonim

Sagot:

Mayroong ilang mga hakbang upang gawin ito, mangyaring huwag pansinin ang aking masamang Ingles, Umaasa ako na maaari mo pa ring maunawaan ang proseso.

Paliwanag:

Hindi ito mahirap kung sa tingin mo.

Sabihin nating gusto nating ihiwalay ang DNA mula sa isang calf thymus, kailangan mong sundin ang mga tagubiling ito (pareho ang mga ito para sa isang mansanas gaya ng alam ko, ngunit may mga maliliit na pagkakaiba-iba):

  1. Kumuha ng 3 piraso ng 3 gramo at i-cut ito sa maliliit na piraso, bilang maliit na bilang hangga't maaari.

  2. Ilagay ito sa isang blender, na may 75 mL Saline-sodium citrate (SSC) sa bawat piraso at tiyakin na ang talim ng blender ay ganap na sakop sa SSC, kaya magdagdag ng piraso ng thymus kung kailangan mo.

    Tinitiyak ng SSC na ang mga lamad ng cell ay binubuwag.

    Panatilihin ang blending hanggang ang lahat ng bagay ay makinis.

  3. Ilagay ito sa isang tubo para sa centrifuge at pakitin ito sa isa pang tubo upang ang centrifuge ay hindi masira

  4. Ilagay ang tubo sa centrifuge sa loob ng 20 minuto sa 5000 rpm

  5. Kapag nakuha mo ang tubes sa labas ng centrifuge dapat mong makita humahawak ng dalawang bahagi. Ang ibaba ay may matibay na substansiya, ito ay tinatawag na pellet at ito ay nagtataglay ng cell nuclei na may DNA. Makakakita ka rin ng likidong substansiya, na tinatawag na supernatant at binubuo ito ng SSC na may dissolved membranes ng cell.

  6. Ibuhos ang supernatant sa isang tuluy-tuloy na paggalaw, ito ay tinatawag na decanting at ito ay umalis sa iyo sa pellet.

  7. Maglagay ng isang maliit na halaga ng 2.2 M NaCl sa tubo na may pellet, upang ang pellet ay sakop lamang sa NaCl. Ang NaCl ay nagdudulot ng mga protina na pumapaligid sa DNA upang mawala.

  8. Pukawin ito sa isang walang laman na test tube o pagpapakilos ng baras. Sa kalaunan dapat kang makakuha ng dalawang bahagi. Ang mga protina sa ilalim at isang nanlalagkit na likido sa ibabaw ng iyon.

  9. Alisin ang viscous fluid sa isang pipette at siguraduhing hindi ka kumuha ng anumang protina sa viscous fluid. (napakaliit na piraso ng protina ay napakahirap iwasan, subalit subukan upang maiwasan ang maraming mga protina hangga't maaari)

  10. Ilagay ang viscous fluid na pipetting mo sa isang beaker at idagdag ito ng 2x ng maraming ethanol. Ngunit idagdag ang etanol nang malumanay dahil ayaw mong ihalo ito sa DNA. Sa interface sa pagitan ng ethanol at ang viscous fluid dapat mong makita ang mga bula ng DNA na paparating.

  11. Malumanay na gumalaw sa isang baras ng salamin, ang DNA ay negatibong sisingilin upang dapat itong manatili sa pamalo.

  12. Ilagay ito sa isang test tube at dissolve ito sa SSC.

Pagkatapos ng isang espesyal na makina sasabihin sa iyo kung gaano kalaki ang DNA na ikaw ay nakahiwalay at kung gaano ito dalisay.