Ano ang chromatography ion exchange? + Halimbawa

Ano ang chromatography ion exchange? + Halimbawa
Anonim

Sagot:

Ito ay isang proseso para sa paghihiwalay ng iba't ibang mga protina batay sa kanilang singil at mga umiiral na mga katangian sa isang materyal.

Paliwanag:

Sa iba't ibang pH iba't ibang mga protina ay may iba't ibang mga singil. Sa pamamagitan ng paglalagay ng isang halo ng mga protina sa isang hanay ng pH maaari kang magkaroon ng isang timpla na naglalaman ng mga protina na may iba't ibang mga katangian ng singil.

Kung ang halong ito ng mga protina ay ibinubuhos sa isang haligi na naglalaman ng isang materyal na may bayad dito ang haligi ay magbubuklod ng mga protina sa tapat na singil.

Pagkatapos ay maaari mong gamitin ang iba't ibang mga solusyon na naglalaman ng iba't ibang mga halaga ng ions upang elute (unstick) ang mga protina mula sa hanay.

Halimbawa, sinasabi mo na may isang halo ng mga protina na kung saan nais mong linisin ang isang partikular na protina. Kung alam mo na sa isang partikular na pH ang iyong protina ng interes ay positibo na sisingilin maaari mong ibuhos ang halo sa isang haligi na naglalaman ng negatibong sisingilin materyal.

Ang lahat ng mga protina na walang singil, o kapag ang negatibong sisingilin ay dumadaloy nang diretso sa hanay. Pagkatapos ay maaari mong bitawan ang iyong positibong sisingilin ng protina sa pagbaha sa hanay na may positibong mga ions na makumpleto ang negatibong singil sa haligi. Ang kumpetisyon na ito ay magiging sanhi ng iyong protina ng interes na maiwasan.

Narito ang isang halimbawa ng nangyayari ito.

Ang bawat tray ay naglalaman ng isang buffer sa isang iba't ibang konsentrasyon at tulad ng makikita sa sample na 175 mM (itaas na kaliwang sulok) napakaliit na pula / kayumanggi protina ay nakatali sa sisingilin lamad dahil mayroong kumpetisyon sa pagitan ng mga ions sa buffer at protina para sa mga sisingilin ng mga binding na site sa lamad (Ang mga ions sa buffer ay may "won" dahil mayroong higit pa sa mga ito at sa gayon ay pinigil nila ang protina mula sa pagbubuklod). Sa sample sa kanang ibaba ng maraming protina ay nakasalalay sa lamad dahil may mga mas kaunting ions na kasalukuyan upang makipagkumpetensya para sa mga umiiral na mga site.

Sa video na ito maaari mong makita ang anion exchange chromatography na operasyon: