Sagot:
Na depende sa uri ng ELISA assay.
Paliwanag:
ELISA = Enzyme Linked Immunosorbent Assay.
Mayroong iba't ibang mga uri ng ELISA assays. Ang kailangan mo ay:
- antibody na may kalakip na enzyme
- antigen kung saan binds ang antibody
- substrate ng enzyme na nagiging sanhi ng isang masusukat na reaksyon
Ang enzyme naka-attach sa antibody ay madalas na HRP (malunggay peroksidase). Ang HRP ay maaaring tumugon sa iba't ibang mga substrates na alinman ang nagbabago ng kulay o nagpapalabas ng liwanag, parehong masusukat.
Ang imahe ay nagpapakita ng isang pangkalahatang-ideya ng iba't ibang uri ng ELISA assays. Ipapaliwanag ko kung paano gumagana ang mga ito sa ibaba.
Direktang ELISA
Ang isang plate ay pinahiran ng antigen (Ag) at isang pangunahing antibody na may enzyme ay idinagdag. Kapag idinagdag ang substrate, magaganap ang reaksyon at proporsyonal sa halaga ng mga antibody-antigen na pakikipag-ugnayan.
Hindi tuwirang ELISA
Muli, ang isang plate ay pinahiran ng antigen at a pangunahing antibody binds sa antigen. A segundaryo antibody ay idinagdag na nagbubuklod sa unang antibody. Ang 2nd antibody ay naglalaman ng enzyme na tumutugon sa substrate.
Sandwich ELISA
Dito dalawa o tatlong antibodies ang nasasangkot. Ang pagkuha ng antibody ay nakakabit sa mga plato at nagbubuklod sa antigen. Sinusundan ito ng parehong mga hakbang tulad ng direktang (isa lamang antibody) o di-tuwirang paraan (dalawang antibodies).
Competitive ELISA
Minsan tinatawag na pagsugpo ng ELISA, ay medyo mas kumplikado. Ang isang plato ay pinahiran ng antigen upang ma-researched. A pangunahing antibody na may enzyme ay unang inkubado na may isang sample na may isang hindi kilalang konsentrasyon ng parehong antigen. Pagkatapos ay idinagdag ito sa plato, na nagpapahintulot sa mga antibodies na libre pa rin sa reaksyon sa antigen sa plato. Matapos ang antibody-antigen complexes ng sample ay hugasan off ang substrate ay idinagdag.
Kapag ang hindi kilalang sample ay may maraming antigen, magkakaroon ng mas kaunting antibody na libre upang makagapos sa plate = mas mababang signal.
Kailangan ni Katie ang limang pagsusulit sa isang klase ng matematika. Kung ang kanyang mga marka sa unang apat na pagsusulit ay 76, 74, 90, at 88, ano ang puntos na dapat makuha ni Katie sa ikalimang pagsusulit para sa kanyang pangkalahatang ibig sabihin ay hindi bababa sa 90?
122 Mean = Kabuuan ng mga pagsusulit na hinati sa kabuuang bilang ng mga pagsusulit Hayaan ang x = ang ika-5 iskor sa iskor Mean = (76 + 74 + 90 + 88 + x) / 5 = 90 Solve sa pamamagitan ng unang pagpaparami ng magkabilang panig ng equation sa 5: = (5 (76 + 74 + 90 + 88 + x)) / 5 = 90 * 5 = 76 + 74 + 90 + 88 + x = 450 Solve para x: x = 450 - 76-74-90-88 = 122
Si Luann Bailey ay karaniwang tumatagal ng 75 minuto upang itala ang mga pagsusulit sa algebra ng kanyang mga mag-aaral. Matapos magtrabaho nang 30 minuto, isa pang guro ng matematika ay tumutulong sa kanya na tapusin ang trabaho sa loob ng 15 minuto. Gaano katagal kukuha ang pangalawang guro upang i-grade ang mga pagsusulit na nag-iisa?
37 minuto at 30 segundo. (37.5 minuto) Magsisimula tayo sa paghati sa trabaho ni Luann sa loob ng 15 minuto. Ang buong trabaho ay kukuha ng kanyang limang 15 minuto agwat. Nagtrabaho siya nang mag-isa para sa dalawa sa mga yugto na iyon kaya ginawa niya ang 2/5 ng trabaho. Ngayon sa tulong ng iba pang guro natapos nila ang 3/5 ng natitirang trabaho sa loob ng isang 15 minuto na panahon. Dahil ang Luann ay may kakayahang 1/5 lamang ng trabaho sa loob ng 15 minuto, ang iba pang guro ay 2/5 ng trabaho sa mga 15 minuto. Nangangahulugan iyon na ang pangalawang guro ay gumagana nang dalawang beses nang mas mabilis hangga't L
Kailan gumawa ng antibodies ang iyong katawan? Ano ang nagpapatibay sa katawan upang gumawa ng mga antibodies o patuloy na ginagawa?
Ang katawan ay gumagawa ng mga antibodies sa panahon ng isang immune tugon. Ang mga antibodies ay hindi palaging ginagawa. Nagsisimula ang kanilang produksyon sa panahon ng isang tugon sa immune. Ang T-lymphocytes ay nakikipag-ugnayan sa isang antigen ng pathogen, karaniwang sa dugo. Sila ay mature sa alinman sa mga cell killer, na nagsisimula upang sirain ang pathogen, o helper cells, na gumawa ng cytokines na senyas sa B-lymphocytes. Kapag natanggap nila ang signal, sila ay mature sa plasma cells at magsimulang gumawa ng mga antibodies. Ang mga ito ay tiyak sa antigen ng pathogen at maaaring mag-target at sirain ito.