Ano ang western blotting?

Ano ang western blotting?
Anonim

Sagot:

Ito ay ang paggamit ng mga antibodies upang makita ang mga protina na pinaghiwalay ng SDS-PAGE at pagkatapos ay inilipat sa isang lamad.

Paliwanag:

Ang mga cell ay naglalaman ng isang halo ng mga protina (maraming libu-libo) at ang mga ito ay maaaring paghiwalayin ng SDS-PAGE.

Pagkatapos ay inilipat ang mga protina mula sa SDS-PAGE, sa pamamagitan ng paggamit ng elektrikal na larangan, mula sa gel patungo sa isang lamad na karaniwang ginawa nitrocellulose o polyvinylidene fluoride (PVDF).

Ang lamad ay sinasaliksik ng isang pangunahing antibody na tiyak sa protina ng interes. Ang pangalawang antibody ay ginagamit upang makita ang pangunahing antibody. Ang pangalawang antibody ay maglalaman ng isang marker na maaaring makita ng isang kemikal na reaksyon upang magbigay ng isang nakikitang band sa lamad, o isang senyas na maaaring makuha ng isang espesyal na kamera.

Kung kinakailangan, mapalawak ko ang sagot na ito sa malalim na bilang na ginawa ko ng ilang daang Western blots sa panahon ng aking karera.